实验室常用贮液与溶液介绍-ag捕鱼平台

一.常用贮液与溶液

1mol/l亚精胺（spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。

1mol/l精胺（spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。

10mol/l乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1l后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(bsa）：加100mg的牛血清蛋白（组分v或分子生物学试剂级，无dna酶）于9.5ml水中（为减少变性，
须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。

1mol/l二硫苏糖醇（dtt）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇
至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/l二硫苏糖醇溶液。

8mol/l乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。

1mol/l氯化钾（kcl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。

3mol/l乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的ph至5.2，再加水定容到100ml。

0.5mol/l edta:配制等摩尔的na2edta和naoh溶液（0.5mol/l），混合后形成edta的三钠盐。或称取186.1g的na2edta·2h2o和20g的naoh，并溶于水中，定容至1l。

1mol/l hepes：将23.8ghepes溶于约90ml的水中，用naoh调ph（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。

1mol/l hcl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。

25mg/ml ipgt：溶解250mg的ipgt（异丙基硫代-β-d-半乳糖苷）于10ml水中，分成小份贮存于-20℃。

1mol/lmgcl2:溶解20.3gmgcl2·6h2o于足量的水中，定容到100ml。

100mmol/l pmsf：溶解174mg的pmsf（苯甲基磺酰氟）于足量的异丙醇中，定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹
或贮存于-20℃。

20mg/ml蛋白酶k（proteinase k）：将200mg的蛋白酶l加入到9.5ml水中，轻轻摇动，直至蛋白酶k完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。

10mg/mlrnase（无dnase）（dnase－free rnase）：溶解10mg的胰蛋白rna酶于1ml的10mmol/l的乙酸钠水溶液中（ph 5.0）。溶解后于水浴中煮沸15min，使dna酶失活。用1mol/l的tris－hcl调ph至7.5，于-20℃贮存。（配制过程中要戴手套）

5mol/l氯化钠（nacl）：溶解29.2g氯化钠于足量的水中，定容至100ml。

10n氢氧化钠（naoh）：溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9l水的烧杯中（磁力搅拌器搅拌），氢氧化钠完全溶解后用水定容至1l。

10％sds（十二烷基硫酸钠）：称取100gsds慢慢转移到约含0.9l的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1l。

2mol/l山梨（糖）醇（sorbitol）：溶解36.4g山梨（糖）醇于足量水中使终体积为100ml。

100％三氯乙酸（tca）:在装有500gtca的试剂瓶中加入100ml水，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。（稀释液应在临用前配制）

2.5％ x－gal（5-溴-4-氯-3-吲哚－β-半乳糖苷）：溶解25mg的x－gal于1ml的二甲基甲酰胺（dmf）,用铝箔包裹装液管，贮存于-20℃。

100×denhardt试剂（denhardt’s regent）

依照上表称取各组分，溶于水中定容。过滤除菌及杂质，分装成小份于-20℃贮存。

10×标准dna连接酶缓冲液（standard dna ligase buffer）（粘端、平端连接）

将配制好的缓冲液分装成小份，贮存于-20℃ 。

100 mmol/l dntp 溶液（dntp solutions）
可以购买到100mmol/l纯dntps贮液，-80℃可贮存至少6个月。

10mmol/l dntp混合液

20％peg 8000/2.5mnacl

加聚乙二醇于含有氯化钠的烧杯中，加水至终体积100ml，用磁力搅拌器搅拌溶解。

20×ssc

溶解柠檬酸三钠（二水）和氯化钠于约0.9l水中，加几滴10n naoh溶液调ph为7.0，用水补足体积至1l。

depc（焦碳酸二乙酯）处理水
加100ul depc 于 100ml 水中，使depc的体积分数为0.1％。在37℃温浴至少12h，然后在15 psi 条件下高压灭菌20min，以使残余的depc失活。depc会与胺起反应，不可用depc处理tris缓冲液。

甲酰胺（deionized formamide）
直接购买或加dowex xg8 混合树脂于装有甲酰胺的玻璃烧杯中，用磁力搅拌器轻轻搅拌1h，可去除甲酰胺中的离子。经whatman 1号滤纸过滤除去树脂后分成小份，充氮气于-80℃贮存（防止氧化）。

磷酸缓冲液（phosphate buffer）
按照下表所给定的体积，混合1 mol/l 的磷酸二氢钠（单碱）和1mol/l 磷酸氢二钠（双碱）贮液，获得所需ph的磷酸缓冲液。配制1 mol/l 的磷酸二氢钠（nah2po4·h2o）贮液：溶解138g于足量水中，使终体积为1l;1mol/l 磷酸氢二钠（na2hpo4）贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1l。

te（用于悬浮和贮存dna）

tris缓冲液（tris-hcl buffer）
将121g的tris碱溶解于约0.9l水中，再根据所要求的ph（25℃下）加一定量的浓盐酸（11.6n），用水调整终体积至1l。