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高效液相色谱仪的操作步骤和注意事项

高效液相色谱仪操作步骤:1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3). 打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4). 进入hplc控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5). 有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速度不要超过10 ml/min。6). 调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,观察基线的情况。7). 设计走样方法。点击file,选取select users and methods,可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,点击new method。选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,点击protocol。一个完整的走样方法需要包括:a.进样前的稳流,一般2-5分钟;b.基线归零;c.进样阀的loading-inject转换;d.走样时间,随不同的样品而不同。8). 进样和进样后操作。选定走样方法,点击start。进样,所有的样品均需过滤。方法走完后,点击postrun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。9). 关机时,先关计算机,再关液相色谱。10). 填写登记本,由负责人签字。

操作注意事项:1). 柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。2). 所有过柱子的液体均需严格的过滤3). 流动相均需色谱纯度,水用20m的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。4). 压力不能太大,最好不要超过2000 psi。

因为每个品牌的仪器和操作界面都不一样,根据其原理和操作的要求,以上步骤仅为企业的一般仪器操作步骤,企业可根据自身的仪器操作说明书进行。