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食品中大肠杆菌检验测试方法

大肠埃希氏菌耐热大肠菌群测试方法
大肠杆菌耐热检验方法适用于各种水样中大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群的快速检验;其原理是:利用耐热大肠菌群是总大肠菌群的一部分.将培养温度提高到44~45℃,在此条件下仍能生长和发酵乳糖的菌群被称为耐热大肠菌群。它们由埃希氏菌属以及克雷伯菌属、肠杆菌属和柠檬酸杆菌属中的一些菌种组成。其中大肠埃希氏菌(e.coli) 是最准确和专一的粪便污染指示菌。与总大肠菌群相比,耐热大肠菌群在水体中的检出,说明水体更为不清洁,存在肠道致病菌和食物中毒菌的可能性更大。大肠埃希氏菌耐热大肠菌群测试片运用酶底物技术,含有大肠埃希氏菌特有葡萄糖醛酸酶(glucuronidase)的显色底物(xgluc/blue),以及耐热大肠菌群半乳糖苷酶(galactosidase)的显色底物(salmongal/red), 经过44.5℃培养后,大肠埃希氏菌显紫蓝色,红色或紫蓝色菌斑都属耐热大肠菌群。

大肠杆菌的快速检验方法对于大肠菌群检验显示阳性的纸片或产酸产气的发酵管,用接种环挑取菌液,转入2-3ml无菌水中混匀,用灭菌吸管吸取1ml慢慢均匀地滴加到大肠埃希氏菌耐热大肠菌群测试片上,然后放下上层膜,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下。将接种好的纸片平放于培养箱中,44.5℃培养15~24h观察结果。测试片上出现红色或紫蓝色菌斑都是耐热大肠菌群阳性,其中紫蓝色为大肠埃希氏菌阳性。没有红色或紫蓝色斑点为阴性结果。

大肠杆菌o157:h7的测试片检测方法
一、大肠杆菌快速检验测试片适用范围:用于各类食品以及人体体检样品中大肠杆菌o157:h7的检测。以及突发事件应急检测需要。

二、大肠杆菌的快速方法原理和方法:采用选择性显色培养基作为主要原料,加入专一性酶显色剂,运用微生物测试片技术,做成一次性快速检验产品,通过接种、培养,如果样品中含有大肠杆菌o157:h7,即可在纸片上呈现紫红色的菌落。 样品处理:无菌操作取25g(ml)样品放入含有225ml无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内,充分振摇或置均质器中制成样品匀液,静置片刻。接种:将测试片水平放在台面上,小心揭开上盖膜,用灭菌吸管吸取1 ml样品上清液或增菌液,均匀加到中央的滤纸片上,然后轻轻将上盖膜放下,静置5min。每个样品接种两片。培养:将加了样的测试片叠放在一起,放入原来的自封袋中,堆叠片数不超过12片,透明膜向上平放在37℃培养箱内培养15h~24h。呈紫红色的菌落为大肠杆菌o157:h7;呈蓝色的菌落为其他大肠菌群。

三、 注意事项:本法还可应用于从业人员体检、中毒样品和物体表面的检测,用取样棉签涂抹被测物体表面,放入装有3ml灭菌生理盐水的试管中,摇晃10s,然后取1ml接种到测试片上。注意使用过的纸片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。出现阳性菌落的样本,最好用其他更为可靠的方法进行验证,没有条件的话至少再取样重复检验一次。