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紫外—可见分光光度法

1、紫外吸收光谱:电子跃迁光谱,吸收光波长范围200400nm,可用于结构鉴定和定量分析。
可见吸收光谱:电子跃迁光谱,吸收光波长范围400760 nm,主要用于有色物质定量分析。

2、紫外光谱中常用的名词术语:
发色团:能产生紫外-可见吸收的官能团如一个或几个不饱和键c=c, c=o, n=n, n=o等
助色团:有一些含有n电子的基团(如-oh、-or、-nh2、-nhr、-x等),它们本身没有生色功能(不能吸收λ>200nm的光),但当它们与生色团相连时,就会发生n—π共轭作用,增强生色团的生色能力(吸收波长向长波方向移动,且吸收强度增加),这样的基团称为助色团。
由于化合物结构变化(共轭、引入助色团取代基)或采用不同溶剂后
      吸收峰位置向长波方向的移动,叫红移
      吸收峰位置向短波方向移动,叫蓝移
增色效应:吸收强度增强的效应
减色效应:吸收强度减小的效应


3、影响紫外-可见吸收光谱的因素
共轭效应的影响
取代基的影响
溶剂的影响

4、紫外-可见分光光度法的定量基础——吸收定律
1)朗伯—比尔定律:在一定条件下,物质的吸光度与溶液的浓度和液层厚度的乘积成正比。     
或:
→a与ε的关系为:a =ε/m  (m为摩尔质量)
ε:摩尔吸光系数,单位l·mol-1·cm-1;
a:吸光系数,单位l·g-1·cm-1
透过度t : 描述入射光透过溶液的程度:
吸光度a与透光度t的关系:
2)偏离比尔定律的因素
a.物理性因素,即仪器的非理想引起的
非单色光、杂散光、非平行入射光都会引起对朗伯—比耳定律的偏离,最主要的是非单色光作为入射光引起的偏离。
b.化学性因素
当溶液浓度c >10 -2 mol/l 时,吸光质点间可能发生缔合等相互作用,直接影响了对光的吸收。故:朗伯—比耳定律只适用于稀溶液。

4、分光光度计的主要部件
光源:可见光区:钨灯作为光源,紫外区:氢、氘灯
单色器
样品室:在紫外区须采用石英池,可见区一般用玻璃池。
检测器:光电池、光电管或光电倍增管。
结果显示记录系统

5、分光光度计的类型
1.单光束:简单,价廉,适于在给定波长处测量吸光度或透光度,一般不能作全波段光谱扫描,要求光源和检测器具有很高的稳定性。
2.双光束:自动记录,快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响,特别适合于结构分析。仪器复杂,价格较高。

6、用仪器测定时应尽量使溶液透光度值在t %=15~65%
(吸光度 a = 0.80~0.20)。