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样品稀释液的选择

普通稀释液
0.1%ph6.8~7.0的无菌蛋白胨水,磷酸盐缓冲溶液或25%ringer氏溶液都是较好的稀释液;0.1%的蛋白胨水要比磷酸盐缓冲液或25%ringer氏溶液保护效果更好,因此是最常用的稀释液。

在最低稀释度时,样品可能会改变稀释液的性质。特别是当样品中水不溶物占的比例很大时,样品在稀释液中的溶解度会受到影响。食品样品的溶解度到底有多大,是不是稀释液的ph或水分活度(aw)也会受到影响。如果有疑问,应该测定第一个稀释度的ph,水分活度可用水分活度仪或类似的仪器测定(通过测定样品中可溶性固型物可以得到水分活度的变化〉。为了防止ph变化,可在稀释液中加入磷酸盐缓冲液。例如dixont和wilson(1960)成功地用ph7.0-7.2 0.5mol/1磷酸盐缓冲液稀释了含园艺肥料的过磷酸钙,从中分离得到沙门氏菌。而以前一直认为这样的肥料不含沙门氏菌。

高溶解度的干燥样品(如奶粉、婴儿食品)在最低稀释度时水分活度很低,应该选择蒸馏水作为稀释液; 一般说来,最合适的稀释液应该通过一系列的试验得到,所选择的稀释液应该具有最高的复苏率。
样品稀释液的制备过程应在15~30min内完成。

2.厌氧微生物的稀释液

对食品中的厌氧微生物进行定性或定量检测时,必须使氧化作用减至最低,此时应使用梭状芽孢杆菌培养基或具有相似成分的培养基作为稀释液。制备样品悬液时应尽量避免氧气进人其中。这时最常用的colworh均质器,而不用顶部搅拌均质器或底部揽拌的均质器,后两者只有当均质容器中充满脱氧氮气时才可使用。

检测对氧气极其敏感的厌氧菌时,除使用适当的稀释液外,还要具备一些特殊的样品防护措施,如使用hungate技术或厌氧工作站等。

3.嗜渗菌和嗜盐菌的稀释液

20%的无菌蔗糖溶液适用于嗜渗菌计数,研究嗜盐菌(如食盐样品)时,可使用15%无菌的氯化钠溶液作为稀释液。