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食品检验中霉菌和酵母菌的检验方法

1、检验原理

霉菌和酵母菌数测定(determination of molds and yeast count)是指化妆品检样在一定条件下培养后,1g或1ml化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌数量,籍以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。

本方法根据霉菌和酵母菌特有的形态和培养特性,在虎红培养基上,置28℃±2℃培养72h,计算所生长的霉菌和酵母菌数。

2、 仪器和设备

培养箱:28℃±2℃;振荡器;天平;三角瓶:250ml;试管:15×150mm;平皿:直径9cm;吸管:1ml、10ml;量筒:200ml;酒精灯; 高压灭菌器

3、 培养基和试剂℃

1)生理盐水

与细菌总数测定用的生理盐水一致。

2)虎红﹙孟加拉红﹚培养基

表37  虎红培养基

成分

用量

成分

用量

蛋白脓

5g

涼脂

20g

葡萄糖

10g

1/3000虎红溶液﹙四氯四碘荧光素﹚

100ml

磷酸二氢钾

1g

氯霉素

100mg

硫酸镁﹙含7h2o﹚

0.5g

蒸馏水

1000ml

制法:将上述各成分﹙除虎红外﹚加入蒸馏水中溶解后,再加入虎红溶液分装后,103.43kpa﹙121151b﹚20min高压灭菌,另用少量乙醇溶解氯霉素,过滤溶解后加入培养基中,若无氯霉素,使用时每1000ml加链霉素30mg

4、操作步骤

1)样品稀释

与细菌菌落总数测定稀释方法一致。

2)培养

取1:10、1:100、1:1000的检液各1ml分别注入灭菌平皿内,每个稀释各用2个平皿,注入融化并冷至45℃±1℃左右的虎红培养基,充分摇匀。凝固后,翻转平板,置28℃±1℃培养72h±2h,计数平板内生长的霉菌和酵母菌数。若有霉菌蔓延生长,为避免影响其它霉菌和酵母菌的计数时,于48h±2h应及时将此平板取出计数。

3)计算方法

先点数每个平板上生长的霉菌和酵母菌菌落数,求出每个稀释度的平均菌落。判定结果时,应选取菌落数在5个~50个范围之内的平皿计数,乘以稀释倍数后,即为每g﹙或每ml﹚检样中所含的霉菌和酵母菌数。其它范围内的菌落数报告应参照菌落总数的报告方法报告之。

5.检验结果

每g﹙或每ml﹚化妆品含霉菌和酵母菌数以cfu/g﹙ml﹚表示。